Når cellerne vi dyrker i

cellefabriker forurenede, de fleste af dem er svære at håndtere.Hvis de forurenede celler er værdifulde og svære at skaffe igen, kan følgende metoder bruges til at fjerne dem.

1. Brug antibiotika

Antibiotika er mere effektive til at dræbe bakterier icellefabrikker.Kombinationsmedicin er mere effektivt end medicin alene.Forebyggende medicin er mere effektiv end medicin efter kontaminering.Forebyggende medicin bruger generelt et dobbelt antibiotikum (penicillin 100u/mL plus streptomycin 100μg/mL).Efter kontaminering skal rengøringsmetoden være 5 til 10 gange større end den sædvanlige mængde.Lægemidlet skal bruges i 24 til 48 timer efter tilsætningen og derefter erstattes med den sædvanlige rutine.Kulturvæske.Denne metode kan være effektiv i de tidlige stadier af kontaminering.Ud over penicillin og streptomycin kan de anvendte antibiotika også omfatte gentamicin, kanamycin, polymyxin, tetracyclin, nystatin osv. Almindelig anvendt er 400 til 800 μg/mL kanamycin eller 200 μg/mL tetracyclin.Mediet skiftes hver 2. til 3. dag og gives videre i 1 til 2 generationer til behandling.I de senere år er det blevet rapporteret, at 4-fluor, 2-hydroxyquinolin (Ciprofloxacin, Cip), Pleu-romutilin-derivat (Pleu-romutilin-derivat, BM-Cyclin2: BM-1 og tetracyclin-derivat (BM-2)) Antibiotika er effektiv til at dræbe mycoplasma, når den anvendes alene eller i kombination.Disse tre antibiotika fremstilles alle i 250X koncentrerede opløsninger i PBS og opbevares ved -20°C til senere brug.Brugskoncentrationen Cip er 10 μg/mL, BM-1 er 10 μg/mL, og BM-2 er 5μg/mL.Ved brug, aspirer først det kontaminerede dyrkningsmedium, tilsæt RPMI1640 dyrkningsmedium indeholdende BM-1, aspirér derefter dyrkningsmediet efter 3 dage, tilsæt RPMI1640 dyrkningsmedium indeholdende BM-2, og dyrkning i 4 dage, og så videre i 3 på hinanden følgende dage .runder, indtil det ved 33258 fluorescerende farvningsmikroskopi er bevist, at mycoplasma er blevet elimineret, derefter tilsættes normalt dyrkningsmedium til dyrkning og passage 3-4 gange.

2. Varmebehandling

Inkubation af kontamineret vævskultur ved 41°C i 18 timer kan dræbe mycoplasma, men har negative virkninger på celler.Derfor bør der udføres en foreløbig test før behandling for at undersøge den opvarmningstid, der kan dræbe mycoplasma i størst muligt omfang og have den mindste indvirkning på cellerne.Denne metode er nogle gange upålidelig.Hvis den behandles med lægemidler først og derefter opvarmes til 41°C, vil effekten være bedre.

3. Brug mycoplasma-specifikt serum

Mycoplasma-kontamination kan fjernes med 5% kanin mycoplasma immunserum (hæmagglutinationstiter 1:320 eller derover).Fordi det specifikke antistof kan hæmme væksten af ​​mycoplasma, bliver det negativt 11 dage efter antiserumbehandling og forbliver negativt 5 måneder senere.er negativ.Denne metode er dog mere besværlig og ikke så bekvem og økonomisk som at bruge antibiotika.

4. Andre metoder

Ud over de ovennævnte metoder til fjernelse af kontaminering findes der også inokulering og steriliseringsmetoder hos dyr, makrofagfagocytosemetoder, metoder til tilsætning af bromouracil til kontamineretkulturflaskerog derefter bestråle dem med lys, og filtreringsmetoder osv., men de er alle mere besværlige og ineffektive.Når først mycoplasma-kontamination sker, medmindre det er af særlig vigtig værdi, bliver det generelt kasseret og genopdyrket.

kontakt venligst Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709